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如何挑選合適的elisa試劑盒■ 背景 Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎（HEV）病毒 IgM 抗體ELISA檢測。 如何挑選合適的elisa試劑盒？ 1、查找待測樣本的蛋白濃度 可以通過NCBI的文獻(xiàn)，給出的蛋白表達(dá)量參考值來比較elisa試劑盒給出的樣本值與報(bào)道值是否一致。 2、試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測樣本的種類 除試劑盒特別說明外，一般不同種屬不能通用。常見待測樣本種類有：血清和血漿（不同抗凝劑），細(xì)胞上清，和細(xì)胞裂解液，試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用。 3、?.檢測范圍： ?建立線性范圍：需測定9-11個(gè)濃度水平，每個(gè)濃度水平重復(fù)測定3-4次。 ?驗(yàn)證標(biāo)稱線性參數(shù)：需測定4-6個(gè)濃度水平，每個(gè)濃度水平重復(fù)測定3-4次。 ?所有樣本應(yīng)在一次運(yùn)行中或幾次間隔很短的運(yùn)行中隨機(jī)測定，最好在一天之內(nèi)完成。 4、試劑盒的其它指標(biāo) a. 靈敏度： ?示例：人IL-13的最低可檢測濃度為0.1 pg/ml(6 次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值)。10 個(gè)零標(biāo)準(zhǔn)品濃度 OD 的平均值加上兩倍SD，計(jì)算最低可檢測濃度。 ?注意：靈敏度跟檢測范圍最低點(diǎn)不相等。 b.?穩(wěn)定性（重復(fù)性、精密性） ?酶標(biāo)板內(nèi)精密度3 個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定 20 次，評估酶標(biāo) 板內(nèi)的精密度。酶標(biāo)板間精密度 3 個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測 6 次，評估酶標(biāo)板間的精密度。 ?試劑盒一般板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% （統(tǒng)計(jì)學(xué)概念）
總結(jié) ?對于elisa試劑盒來說，正確的處理樣本是保證檢測準(zhǔn)確性和正確性的一步。正式實(shí)驗(yàn)之前使用少量的樣本進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，可以選擇2、5、10倍稀釋樣本，選擇合適的稀釋比例進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，這點(diǎn)非常重要！千萬不能圖省事，到時(shí)濃度太大超過檢測限值，數(shù)據(jù)測不出，不僅費(fèi)時(shí)費(fèi)力，還要心疼咱的科研經(jīng)費(fèi)。同時(shí)，樣本的保存也非常重要，保存不當(dāng)或在冰箱里保存過久的樣本，血清中lgG可聚合成多聚體，導(dǎo)致結(jié)果偏高。建議五天內(nèi)檢測的血清樣本可短暫存放4℃，一周之后測定的血清樣本應(yīng)該低溫凍存，同時(shí)切忌反復(fù)凍融。如果是血清樣本，也要主要樣本不能有溶血、脂血和細(xì)菌等殘留，這些樣本中存在非特異性顯色影響結(jié)果。 九邦生物ELISA試劑盒  九邦生物是一家專業(yè)從事細(xì)胞生物學(xué)與免疫學(xué)相關(guān)的檢測試劑的研發(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)的高技術(shù)企業(yè)，目前，已建立ELISA科研試劑盒、生化試劑盒、培養(yǎng)基、血清等生物科研用品的一站式服務(wù)平臺，公司同時(shí)提供相關(guān)配套實(shí)驗(yàn)解決方案和檢測服務(wù)，自成立之初，泉州九邦生物科技有限公司就認(rèn)識到產(chǎn)品質(zhì)量是企業(yè)高速成長的生命線；為此，在每一類產(chǎn)品的生產(chǎn)過程中，逐步建立起有針對性的、標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝與質(zhì)控體系，確保產(chǎn)品的規(guī)?；a(chǎn)與質(zhì)量穩(wěn)定。同時(shí)，根據(jù)市場的需求，不斷地進(jìn)行產(chǎn)品改進(jìn)與新產(chǎn)品研發(fā)，緊跟現(xiàn)代生物學(xué)研究與應(yīng)用的前進(jìn)步伐！致力于每位客戶的滿意和成功，為客戶提供有競爭力的產(chǎn)品和解決方案，持續(xù)為客戶創(chuàng)造大價(jià)值是泉州九邦生物科技有限公司一貫秉承的信念。 |
